کلون سازی، تعیین ترادف و بیان ژن core ویروس هپاتیت c جدا شده از یک بیمار ایرانی مبتلا به هپاتیت مزمن

مقدمه: ویروس هپاتیت c یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده هپاتیت حاد ومزمن، سیروز و سرطان کبد در سطح جهان محسوب می شود. به دلیل روند رو به رشد ابتلا به hcv در سطح دنیا تحقیقات گسترد ه ای در نقاط مختلف جهان برای افزایش کیفیت روشهای تشخیصی و تعیین ژنوتیپ ویروس در حال انجام است. روشها: در این تحقیق ناحیه ژنی مربوط به پروتئین نوکلئوکپسید ویروس (ژن core) که یک ناحیه بسیار حفاظت شده درطول ژنوم ویروس است، از سرم یک بیمار ایرانی با روش rt-pcr جدا شده و پس از کلون سازی در وکتور 18 puc با پرایمر های یونیورسال تعیین ترادف شد. به منظور تولید پروتئین نوترکیب coreژن تعیین ترادف شده در وکتور بیانی a 28 pet کلون شد و پلاسمید نوترکیب حاصل به باکتری (3 de) 21 bl منتقل گردید. نتایج و بحث: نتیجه تعیین ترادف نشان داد که ژن core جداشده از یک بیمار ایرانی 96 درصد شباهت با سویه a1 و 95 درصد شباهت با سویه b1 ویروس هپاتیت c دارد. این نتیجه با نتایج سایر تحقیقات انجام شده در این زمینه مطابقت دارد. وجود باند 5/23کیلودالتون در ژل sds-pageو تست وسترن بلات با آنتی بادیهای مونوکلونال بیان پروتئین core را اثبات نمود. با تولید انبوه این پروتئین، می توان از آن برای استفاده در کیتهای تشخیصی بهره جست.